测试DC-SIGN/R多价值莱克-甘氨酸相互作用的pH依赖性,使用多价值甘氨酸-黄金纳米粒子

科学领域:

• 分子生物学分子生物学
• 免疫学 免疫学 免疫学
• 病毒学 病毒学

背景情况:

• 树突细胞特异性细胞间因子 (DC-SIGN) 和其同类DC-SIGNR是参与病毒结合和传播的关键讲蛋白.
• 这些讲蛋白通过细胞内贩运途径调解了埃博拉病毒,艾滋病毒,HCV和SARS-CoV-2等病毒的吸收和释放.
• DC-SIGN/R与甘氨酸配体的pH依赖的结合特性对于理解病毒传播机制至关重要.

研究的目的:

• 为了研究DC-SIGN和DC-SIGNR.的pH取决于多价值的莱克-甘氨酸相互作用 (MLGI) 特性.
• 使用新型的糖基化黄金纳米粒子 (glycan-GNP) 探针进行DC-SIGN/R MLGI的定量分析.
• 在不同的pH条件下阐明DC-SIGN/R的结构信息,结合点方向和结合模式.

主要方法:

• 开发密度高的糖化金纳米颗粒 (glycan-GNPs) 作为DC-SIGN/R MLGI的探针.
• 使用甘氨酸-GNP探针对MLGI亲缘关系和结构信息的定量测量.
• 对DC-SIGN/RMLGI在生理和溶酶体pH范围 (7.4~4.6) 的pH依赖性的研究.

主要成果:

• 在pH 7.4~5.8之间,DC-SIGN对甘氨酸-GNP具有强烈而稳定的结合,在pH ≤5.4时结合显著减弱,在pH 4.6时潜在解离.
• 随着pH值从7.4降至5.4,DC-SIGNR显示了对甘氨酸-GNP的增强亲和力,pH值在5.4时具有最佳的结合,然后在较低的pH值下降亲和力.
• 与甘氨酸-GNP结合的DC-SIGN和DC-SIGNR结合都以pH依赖的方式显示了部分可逆性.

结论:

• DC-SIGN/R 独特的依赖pH值的结合特性对于它们在病毒相互作用和细胞内贩运中的作用至关重要.
• 观察到的DC-SIGN的pH依赖性行为与其作为内细胞循环受体的功能一致.
• 甘氨酸-GNP探针是研究DC-SIGN/R多价值莱克-甘氨酸相互作用的复杂,pH敏感机制的有效工具.