眼内mRNA输送与内源的基于MmPEG10的病毒样颗粒
Mengke Li1, Zhong Liu2, Dongliang Wang2
1State Key Laboratory of Ophthalmology, Zhongshan Ophthalmic Center, Sun Yat-sen University, Guangdong Provincial Key Laboratory of Ophthalmology and Visual Science, Guangzhou, 510060, China; Research Unit of Ocular Development and Regeneration, Chinese Academy of Medical Sciences, Beijing, 100085 China.
Experimental eye research
|April 18, 2024
概括
新的病毒样颗粒 (VLP) 有效地将mRNA传递给眼睛细胞,包括视网膜色素上皮细胞和角膜细胞. 这些VLP显示了眼部基因治疗的前景,而不会引起显著的免疫反应.
科学领域:
- 眼部基因疗法是一种眼部基因疗法.
- 分子和细胞生物学分子和细胞生物学.
- 生物技术是生物技术.
背景情况:
- 病毒样粒子 (VLP) 是强大的细胞内基因传递工具.
- 它们在眼部基因治疗中的应用在很大程度上尚未被探索.
- 解决这个差距对于推进眼病治疗至关重要.
研究的目的:
- 为了生成和评估囊性口腔炎病毒糖蛋白 (VSVG) 伪型小鼠PEG10 (MmPEG10) -VLP用于眼部mRNA输送.
- 评估MmPEG10-VLP在转导视网膜色素上皮质 (RPE) 和角膜细胞中的疗效.
- 研究MmPEG10-VLP在治疗性基因转移方面的潜力,例如SMAD7传递.
主要方法:
- 产生VSVG伪型的MmPEG10-VLP.
- 在体外将GFP mRNA输送到ARPE-19细胞.
- 在成年小鼠体内进行体外和体内注射.
- 室内输送以评估角膜转导.
- 免疫反应和治疗性基因转移的评估 (SMAD7).
主要成果:
- PEG10-VLP有效地将GFP mRNA传递给ARPE-19细胞,从而导致短暂的表达.
- MmPEG10-VLP成功地转移了SMAD7,抑制了RPE细胞中的上皮层-介质细胞过渡.
- 在小鼠的视网膜下输送导致了高效的RPE转导和GFP表达,而没有显著的免疫反应.
- 室内分娩显示在角膜内皮细胞中短暂的GFP表达.
- 内注射对眼部表达不有效.
结论:
- 以VSVG伪型的MMPEG10基VLP在体内有效转导线性不活跃的RPE细胞和角膜内皮细胞.
- 这些VLP显示了眼部基因治疗应用的潜力,包括将基因转移到RPE和角膜细胞.
- 缺乏显著的炎症反应凸显了这些VLP在眼部输送中的安全性.
