HLM芯片 - 一种微流体方法,使用固定的人类肝脏显微体研究细胞染色体P450抑制的机械基础
Tea Pihlaja1, Iiro Kiiski2, Tiina Sikanen1
1Drug Research Program, Faculty of Pharmacy, University of Helsinki, Finland; Helsinki Institute of Sustainability Science, University of Helsinki, Finland.
这项研究引入了一个微流体芯片与固定的人类肝脏显微体,用于研究药物相互作用. HLM芯片准确测量CYP2C9抑制,并区分可逆和不可逆的抑制剂,简化药物相互作用研究.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 药理学 药理学是指药理学的学科.
- 微流体学 微流体学
背景情况:
- 细胞染色体P450 (CYP) 系统对于药物代谢至关重要,也是药物相互作用 (DDI) 的常见地点.
- 无法逆转的CYP抑制带来严重的风险,导致永久性酶失活,需要新的酶合成才能恢复.
- 目前研究CYP抑制机制的方法往往复杂且耗时.
研究的目的:
- 概念化和评估机械CYP抑制研究的微流体方法,使用动不动的人类肝脏显微体 (HLM).
- 评估HLM芯片对CYP2C9.9的稳定性,酶动力学和抑制潜力.
- 使用开发的微流体系统,区分可逆和不可逆的CYP抑制剂.
主要方法:
- 在聚合物微柱阵列上固定HLM的微流体芯片的开发.
- 在微流体流动下对CYP2C9的酶动力学和稳定性的评估.
- 确定已知CYP2C9抑制剂 (硫,酸,米可纳) 的半最大抑制度 (IC50) 并分析其抑制机制.
主要成果:
- 该HLM芯片显示了可比的酶动力学 (KM) 与CYP2C9.9的静态HLM化.
- 从微流体检测中获得的IC50值与所有测试的抑制剂的标准检测相对应得很好.
- 该HLM芯片成功地区分了可逆性 (硫) 和不可逆性 (二酸) 抑制,并确定了米可纳作为一种长期,可能不可逆性的抑制剂.
结论:
- HLM芯片是机械CYP抑制研究的可行和有效工具,简化了当前的工作流程.
- 这种微流体方法可以准确地确定CYP抑制动力学和机制,包括识别不可逆转的抑制剂.
- HLM芯片在促进药物相互作用研究和药物开发方面具有重大潜力.
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