设计和验证功能化氧化还原反应性水凝珠,用于抗体分泌哺乳动物细胞的高通量查

科学领域:

• 生物技术是生物技术.
• 细胞生物学 细胞生物学
• 微流体学 微流体学

背景情况:

• 抗体药物对于诊断和治疗至关重要.
• 哺乳动物细胞对抗体的产生面临着由于细胞异质性的挑战.
• 基于滴滴的微流体平台为高通量查 (HTS) 提供了解决方案.

研究的目的:

• 设计一个集成的系统,用于分隔,选,选择,检索和恢复高抗体分泌的中国仓鼠卵巢 (CHO) 细胞.
• 开发功能化的反氧反应性水凝珠 (redox-HBs) 用于抗体捕获和细胞恢复.
• 为了证明平台在选择单细胞用于生物制药生产方面的潜力.

主要方法:

• 酶性化以制备与二硫化物结合的氧化还原-HBs.
• 氧化还原-HBs与蛋白质G的功能化,用于抗体捕获.
• 封装CHO细胞共同生产免疫球蛋白G (IgG) 和绿色光蛋白 (GFP).
• 捕获的抗体的光染色使用蛋白质L结合的卜过氧化酶和铁胺胺放大.
• 光激活滴滴分类用于细胞选择.
• 减少二硫化物键以恢复细胞.

主要成果:

• 在功能化氧化还原-HBs中成功封装和选CHO ((IgG/GFP) 细胞.
• 有效捕获和基于光的检测在珠子内分泌的抗体.
• 使用 redox-HBs 降解对选择后细胞恢复的证明.
• 表示该平台在生物制药生产中单细胞选择的潜力.

结论:

• 使用氧化还原-HBs开发的综合系统是用于抗体发现的有前途的HTS平台.
• 该平台有助于高抗体产生细胞的有效选择和恢复.
• 这项技术有可能促进生物制药细胞系的发展.