DAB-APT:一种基于光的测试方法,用于确定氨基转移酶活性和抑制

科学领域:

• 生物化学 生物化学
• 分子生物学分子生物学
• 药物发现 药物发现 药物发现

背景情况:

• 多氨酸是重要的多化分子,参与许多细胞功能.
• 氨基转移酶 (APT) 合成聚氨酸,是癌症,感染和神经退行性疾病的治疗点.
• 在APT研究中的一个重大障碍是缺乏高通量活动测试.

研究的目的:

• 开发和验证一种基于高通量光的新型试验,用于测量氨基转移酶 (APT) 活性.
• 使用1,2-二甲基 (DAB) 来敏感检测APT酶活性.

主要方法:

• 开发了DAB-APT测定方法,使用1,2-二甲基乙,它与聚氨酸形成光结合物.
• 测量光强度,与聚胺链长度和APT活性相关.
• 使用来自*Saccharomyces cerevisiae*和*Plasmodium falciparum*的APT酶验证了测定.

主要成果:

• DAB-APT试验证明了APT活性可靠的测量.
• 测试灵敏度随着多氨基的碳链长度 (putrescine,spermidine,spermine) 的增加而增加.
• 该试验适用于化学库的高通量选.

结论:

• 新的DAB-APT试验提供了一种可靠的方法来量化APT活动.
• 这种测定有助于药物发现工作,针对各种疾病的APT,包括传染病,癌症和神经生物学.
• 试验的高吞吐量性质加速了新疗法的研究和开发.