有效的流通抛光策略用于旋进入孔双特异抗体
Serene W Chen1, Kong Meng Hoi1, Farouq Bin Mahfut2
1Downstream Processing Group, Bioprocessing Technology Institute, Agency for Science, Technology and Research, Singapore, Singapore.
Bioresources and bioprocessing
|April 22, 2024
概括
开发双特异性抗体 (bsAbs) 是一个挑战. 使用Capto Butyl ImpRes和Capto粘合树脂的新型流通抛光策略有效地去除杂质,实现治疗性bsAbs的高纯度.
科学领域:
- 生物制药制造业 生物制药制造业
- 蛋白质化学 蛋白质化学
- 下游加工 下游加工
背景情况:
- 双特异性抗体 (bsAbs) 具有显著的治疗潜力,但存在下游处理挑战.
- 为了达到bsAbs的高纯度,需要有效地去除诸如宿主细胞蛋白 (HCP) 和分子量变异 (HMW/LMW) 等杂质.
- 传统的净化方法可能很复杂,可能无法充分解决bsAbs.的独特挑战.
研究的目的:
- 开发和验证高纯度双特异抗体的可扩展下游加工策略.
- 评估通过流动抛光步骤在从bsAbs.中去除杂质的有效性.
- 通过实验设计 (DoE) 来优化净化条件,以加强工艺.
主要方法:
- 在净化研究中使用了两种knob-into-hole (KiH) bsAb结构.
- 采用了蛋白质A亲和染色图步骤,其次是用Capto Butyl ImpRes和Capto粘合树脂进行两个连续的流通抛光步骤.
- 实验的应用设计 (DOE) 以指导优化流通抛光策略.
主要成果:
- 在宿主细胞蛋白 (HCPs) 中实现了显著的减少,达到17至35倍.
- 降低高分子量 (HMW) 和低分子量 (LMW) 物种的分别约为4-6%和1%.
- 证明产品回收率高,在56-87%之间,同时满足严格的纯度要求 (<1% HMW,<1% LMW,<100 ppm HCP).
结论:
- 两步的流通抛光策略,遵循蛋白质A染色学,对于净化双特异性抗体非常有效.
- 这种方法简化了操作,避免了与绑定和逃脱模式相关的聚合问题,并与过程强化目标保持一致.
- 开发的方法使得能够生产高纯度的bsAbs,适用于高负载能力 (30-60 mg/mL-树脂) 的治疗应用.
