甲固定和嵌组织储存时间对RNAscope in situ杂交信号放大时间的影响
Megan E Colburn1, Martha A Delaney1, Gretchen C Anchor1
1Zoological Pathology Program, College of Veterinary Medicine, University of Illinois at Urbana-Champaign, IL, USA.
概括
RNAscope in situ杂交 (ISH) 可靠地检测到存档的甲固定,嵌 (FFPE) 组织中的RNA,即使经过长时间的存储和固定. 这种方法适用于使用较旧标本进行回顾性研究.
科学领域:
- 分子生物学分子生物学
- 组织病理学 组织病理学
- 生物技术是生物技术.
背景情况:
- RNAscope in situ杂交 (ISH) 用于检测甲固定,嵌 (FFPE) 组织中的RNA.
- 有关长时间储存FPE和甲固定对RNAscope ISH信号检测的影响存在担忧,这可能会限制其在回顾性研究中的使用.
研究的目的:
- 评估甲固定时间和FFPE存储时间对RNAscope ISH信号检测的影响.
- 建立使用RNAscope ISH与存档组织样本的参数.
主要方法:
- 评估了参考基因 (16srRNA) 在各种持续时间 (1-270天) 固定组织中的信号.
- 通过RNAscope ISH进行犬病毒 (CDV) RNA检测与通过FFPE组织中通过免疫组织化学检测 CDV抗原进行了定性比较,存储时间长达15年.
主要成果:
- 在180天的甲固定后,信号强度和区域下降,在270天没有可检测的信号.
- RNAscope ISH在FFPE组织中成功检测到存储长达15年的RNA标.
结论:
- RNAscope ISH是一种可行的方法,用于检测FFPE组织中的RNA点,这些组织经历了长时间的甲固定和延长的储存.
- 这些发现支持RNAscope ISH对于使用存档标本进行回顾性研究的实用性.
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