角膜上皮细胞培养技术的比较,用于收集条件介质

科学领域:

• 再生医学是一种再生医学.
• 眼科医生 眼科 眼科
• 干细胞生物学 干细胞生物学

背景情况:

• 介质细胞干细胞 (MSCs) 具有再生疗法的潜力.
• 角膜上皮细胞对于保持眼睛表面完整性至关重要.
• 开发有效的方法来将MSC分化为角膜上皮细胞对于治疗角膜疾病至关重要.

研究的目的:

• 确定最大限度地提高条件培养基产量的最佳协议.
• 评估人类角膜上皮细胞的五种不同的初级培养技术.
• 确定最好的介质来将骨髓MSC分化为角膜上皮细胞.

主要方法:

• 评估了五种技术:水友性/非水友性小瓶中的扩展剂,羊水膜培养,酶消化和角膜擦除.
• 来自这些培养的条件介质被用于MSC差异化.
• 分化细胞的特征是使用流动细胞计量来确定泛细胞卡素,细胞卡素3和细胞卡素12的表达.

主要成果:

• 水友表面处理的软瓶产生了最大的调节介质体积.
• 未经处理的小瓶没有很大的成功;酶性消化和擦除导致纤维细胞污染.
• 胚胎膜培养只在第一个汇合时提供了介质.
• 通过高表达细胞克拉丁3 (95.3%),细胞克拉丁12 (93.4%) 和全细胞克拉丁 (95.3%) 证实了成功的分化.

结论:

• 在水友表面处理瓶中培养角膜上皮细胞扩散剂是高产量条件介质采集的优越方法.
• 这种优化的介质有效地支持介质干细胞分化为角膜上皮细胞.
• 这些发现为产生用于治疗应用的角膜上皮细胞提供了一个强大的协议.