开发一种反转录循环介导的异热放大试验,使用新的定量pH生物传感器读取方法来检测SARS-CoV-2

科学领域:

• 分子生物学分子生物学
• 生物技术是生物技术.
• 传染病诊断 传染病诊断 传染病诊断

背景情况:

• 反转录循环介导的同热放大 (RT-LAMP) 提供了比RT-PCR更快的SARS-CoV-2检测.
• 目前的RT-LAMP测试通常依赖于主观的视觉解释.
• 为了可靠的RT-LAMP诊断,需要客观的量化.

研究的目的:

• 开发和验证用于检测SARS-CoV-2的具有定量pH测量的RT-LAMP试验.
• 将pH生物传感器读数的性能与定性方法进行比较.
• 评估这种定量方法对客观分子诊断的潜力.

主要方法:

• 开发了一种新的便携式pH生物传感器,用于定量RT-LAMP.
• 使用57个临床COVID-19样本验证了测试.
• 将pH传感器结果与色度解释和凝电泳进行比较.
• 与RT-PCRCt值相关联的生物传感器pH读数.

主要成果:

• 在RT-LAMP试验中,检测极限 (LoD) 为10^3副本/μL.
• pH传感器显示高特异性 (87.5%) 和概率比 (6.72).
• 在COVID-19阳性 (6.15 ± 0.27) 和阴性 (6.72 ± 0.22) 样本之间观察到显著的pH差异 (p < 0.0001).
• 在生物传感器pH值和RT-PCRCt值之间发现了强烈的相关性 (r = 0.78,p < 0.0001).

结论:

• 具有定量pH传感器读数的RT-LAMP为主观解释提供了一个客观的替代方案.
• 这种方法与RT-PCR有很强的相关性,表明其诊断潜力.
• 开发的测定方法适用于快速,简单和客观的SARS-CoV-2检测.