使用四甲基 (TEA) 和Tris加载来阻断完整细胞中的TRPM7通道
Katherine G Holderby1,2, J Ashot Kozak2
1Undergraduate Program in Physiology and Neuroscience, Dayton, OH, United States.
Frontiers in pharmacology
|April 25, 2024
概括
乙 (TEA) 和类似的化合物阻断T细胞中的外向TRPM7电流. 这种电压依赖阻塞为研究完整细胞中的TRPM7通道功能提供了一个新的工具.
科学领域:
- 离子通道电生理学
- 分子和细胞生理学分子和细胞生理学.
- 离子通道的药理学
背景情况:
- 甲基 (TEA) 是众所周知的各种通道的阻断剂.
- TRPM7通道呈现着的向外整形,使它们易受电压依赖阻塞的影响.
- 现有的TRPM7抑制剂往往缺乏电压依赖性,这限制了它们在研究完整细胞中通道功能的使用.
研究的目的:
- 通过细胞内应用TEA及其类似物来研究TRPM7通道的电压依赖性阻塞.
- 探索TEA,TMA和Tris作为研究TRPM7通道功能的药理学工具的潜力.
主要方法:
- 补丁电生理学被用来记录HEK293和Jurkat T细胞中的全细胞和穿孔补丁电流.
- 细胞被装载TEA,TMA或Tris通过夜间化或内部溶液.
- 在各种条件下测量TRPM7电流,包括不同度的阻塞和电压协议.
主要成果:
- 细胞内TEA和TMA首选地以电压依赖的方式阻断外向TRPM7电流.
- TRPM7的内流在很大程度上不受细胞内TEA和TMA的影响.
- 一种常见的缓冲剂Tris-HCl也表现出对外 TRPM7 电流的电压依赖性阻塞.
- 在全细胞记录中,TEA 的阻塞是可逆的,但在穿孔贴片记录中是不可逆的.
结论:
- 对TEA,TMA和Tris的细胞内载荷提供了一种新的方法,用于对TRPM7通道的电压依赖性阻塞.
- 这些化合物可用于剖析TRPM7在完整细胞中的生理作用.
- 这些发现凸显了电压依赖阻断剂在研究离子通道功能的实用性.
