使用ALDH活性和线粒体ROS含量对中介质层细胞增殖和分化的功能单细胞分析

科学领域:

• 干细胞生物学 干细胞生物学
• 细胞的新陈代谢
• 介质细胞流体细胞生物学

背景情况:

• 甲基脱酶 (ALDH) 表达细胞 (ALDHhigh) 在介质细胞 stromal 细胞 (MStroCs) 之前与干细胞特性有关.
• 然而,MStroCs的异质性提出了关于ALDH作为真实中干细胞 (MSCs) 标记物的特异性的问题.

研究的目的:

• 在不同氧气条件下研究高ALDH和低ALDHMStroC的干细胞潜力.
• 确定ALDH是否是MSCs的特定标记物,并探索用于识别干细胞/祖细胞的替代标记物.

主要方法:

• 在低 (0.1% O2) 和标准 (20% O2) 氧度下培养的 ALDHhigh 和 ALDHlow MStroC 的单细胞克隆分析.
• 增殖和差异化潜力的评估.
• 使用MitoSOX (MSX) 测量反应性氧物种 (ROS) 水平.

主要成果:

• 高ALDH的MStroC表现出丰富的增殖能力和多效力,特别是在低氧 (0.1%O2) 时,与降低的ROS水平相关.
• 单独的ALDH表达并不特定于MSCs,因为在ALDH低分数中也发现了干细胞/原生细胞.
• 低MitoSOX (MSX) 的MStroCs始终显示干细胞/原生细胞的丰富,无论ALDH表达或氧气水平如何.
• 0.1% O2 的 ALDHhighMSXlow 分数几乎完全由真正的 MSCs 组成,而 MSXhigh 细胞缺乏干细胞/原始细胞特性.

结论:

• 在异构的MStroC种群中,ALDH表达不是确定MSCs的确定标记.
• 使用ALDH表达和ROS含量 (MSX) 的组合细胞分类可以有效地隔离具有干细胞/原始细胞特性的MStroC,并排除非原始细胞.