定量阶段成像作为纳米粒子诱导细胞毒性评估的敏感选方法.

科学领域:

• 纳米技术纳米技术
• 毒理学 毒理学 毒理学
• 生物物理学的生物物理.

背景情况:

• 由于缺乏标准化测试指南,评估纳米颗粒细胞毒性是复杂的.
• 纳米颗粒的独特特性可能会干扰传统的生物化学分析,需要多种测试方法.
• 需要采用不受粒子影响的方法,整合分子技术,以可靠的纳米粒子评估.

研究的目的:

• 研究数字全息显微镜 (DHM) 在细胞毒性评估的多模式方法中的能力.
• 为了比较DHM检测到的细胞效应与下游生物化学测试,以评估纳米粒子毒性.
• 为了确定DHM对代谢活性和乳酸脱酶试验的敏感性,检测纳米粒子诱导的细胞毒性.

主要方法:

• 使用定量DHM相位对比度来测量暴露于聚基烯酸) 纳米粒子后RAW 264.7巨细胞和NIH-3T3纤维细胞的干质变化.
• 将DHM结果与细胞毒性 (数字) 和中等对照进行了比较.
• 通过WST-8代谢活动试验评估细胞活力和通过乳酸脱酶 (LDH) 释放试验评估细胞死亡.

主要成果:

• 与WST-8和LDH测定相比,DHM在检测纳米颗粒对测试细胞系的影响方面表现出更高的灵敏度.
• 定量DHM有效地测量了干质量增加作为细胞对纳米粒子反应的指标.
• 通过DHM确定的平均半最大有效度 (EC50) 对纳米载体效应更敏感.

结论:

• 数字全息显微镜是一种有前途的无标签技术,用于敏感和全面的纳米粒子细胞毒性评估.
• 由于DHM的样本交互最小,因此可以进行下游分析,支持多式联络测试策略.
• 将DHM集成到纳米粒子测试程序中可以提高可靠性和标准化,克服当前生物化学分析的局限性.