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Updated: Jun 27, 2025
06:41
Isolation of Primary Mouse Lung Endothelial Cells
Published on: November 10, 2021
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不同组织解离协议对开发小鼠肺部内皮细胞恢复的影响
Francesco Palumbo1,2,3, Miša Gunjak2,3,4, Patty J Lee5
1Flow Cytometry Core Facility, School of Life Sciences, École Polytechnique Fédérale de Lausanne (EPFL), Lausanne, Switzerland.
概括
与disaase相比,原酶A在分离来自小鼠的多种肺内皮细胞方面优越. 这种酶方法改善了研究应用的细胞恢复和亚型表示.
科学领域:
- 细胞生物学 细胞生物学
- 免疫学 免疫学 免疫学
- 肺部研究 肺部研究
背景情况:
- 内皮细胞对肺功能至关重要,并使用流细胞计和细胞分类进行研究.
- 生成可行的单细胞悬浮是内皮细胞隔离的关键先决条件.
- 酶分离方法,如原酶A和消散酶,通常用于组织消化.
研究的目的:
- 为了比较原酶A和disaase的疗效,从小鼠肺部分离内皮细胞.
- 评估这些酶对内皮细胞产量,活力和亚型多样性的影响.
- 评估组织解离方法对单细胞RNA测序 (scRNA-Seq) 结果的影响.
主要方法:
- 青少年和成年老鼠肺组织的酶性消化,使用单独或组合的原酶A和消散酶.
- 对内皮细胞数量和活性的恢复细胞群的评估.
- 单细胞RNA测序 (scRNA-Seq) 用于分析分离的内皮细胞的亚型组成.
主要成果:
- 与disaase相比,原酶A提供了8-12倍更高的可活性内皮细胞从发育中的小鼠幼中恢复.
- 分散对于上皮细胞的恢复更有效,但产生更少的内皮细胞.
- scRNA-Seq表明,原酶A能分离出各种各样的肺内皮细胞亚型 (动脉,毛细血管,静脉,淋巴细胞).
- 迪斯帕斯主要分离了毛细体内皮细胞的受限子集,其它子类型的表现不佳.
结论:
- 组织解离方法显著影响内皮细胞恢复和亚型表示.
- 原酶A是一种更有效的酶,用于获得全面多样化的肺内皮细胞池,用于下游分析,如scRNA-Seq.
- 酶的选择对于肺部研究中内皮细胞群的准确评估至关重要.
