L-阿斯巴拉基纳斯来自超热友的古老菌Thermococcus sibiricus的结合物,具有改善的生物催化特性
Natalia V Dobryakova1,2, Maria V Dumina1, Alexander A Zhgun1
1Group of Fungal Genetic Engineering, Federal Research Center "Fundamentals of Biotechnology of the Russian Academy of Sciences", 117312 Moscow, Russia.
与聚乙烯糖醇等聚合物结合L-氨酸酶可提高其稳定性和活性,使其更适合用于减少致癌性烯胺形成的工业应用.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 酶工程是什么? 酶工程是什么?
- 食品科学 食品科学 食品科学
背景情况:
- 来自*Thermococcus sibiricus* (TsA) 的L-氨酸酶在食品工业中具有降低致癌性烯胺的潜力.
- 工业应用需要具有增强稳定性和催化效率的酶.
研究的目的:
- 调查聚化 (聚氨酸:聚乙烯胺,精氨酸) 和未充电 (聚乙烯糖醇) 聚合物的对TsA的催化参数和热稳定性的影响.
- 评估修改后的TSA是否适用于工业用途.
主要方法:
- TsA与聚氨酸 (PEI,Spm) 和聚乙烯糖醇 (PEG) 的结合.
- 使用CD光谱学分析酶二次结构.
- 确定酶活性,基质结合,以及最佳的pH/温度.
- 使用HPLC和CD光谱评估热稳定性和热失活机制.
主要成果:
- 结合并没有显著改变TsA的二次结构或基质结合.
- PEG稳定了TsA的二次形式.
- 与原生TsA相比,结合物在pH7.5和85°C时表现出10-50%的最大活性.
- 对于TsA-PEI和TsA-Spm,pH最佳值转移到8.0,其中TsA-Spm在pH6.5-9.0之间表现出最高的活性.
- 对结合物来说,最佳温度转移到80-85°C.
- 与原生TsA.不同的是,TsA-PEG在没有聚合的情况下显示了改变的热无活化,而不是原生TsA.
结论:
- TsA-PEG表现出更好的热稳定性和改变的热无活化,这表明它是工业应用中更稳定的形式.
- 聚合物结合为食品加工应用中增强酶特性提供了可行的策略.
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