使用人类和小鼠肠道器官生成和分析芯片器官的协议

科学领域:

• 生物医学工程 生物医学工程
• 细胞生物学 细胞生物学
• 胃肠病学 胃肠病学

背景情况:

• 器官芯片技术提供了先进的体外建模能力.
• 肠道有机体保持细胞的多样性和功能,但面临着光线的难以进入.
• 将器官芯片技术与有机器人相结合,可以解决这些局限性.

研究的目的:

• 为生成和分析人类和小鼠肠道器官在芯片上提出一个全面的协议.
• 为了使肠表皮的顶部和基底侧的独立刺激和采样.
• 为研究肠道生理学和体外疾病提供一个强大的平台.

主要方法:

• 肠道有机体线的建立.
• 单细胞解离和准备有机体用于芯片播种.
• 芯片制备,包括表面处理和组装.
• 在微流体芯片中播种有机物.
• 进行透性测试.
• RNA隔离,染色和成像用于分析.
• 独立刺激和从顶部和基底区抽取样本.

主要成果:

• 在微流体芯片中成功生成和整合肠道有机体.
• 在器官在芯片系统中证明了保存的细胞多样性和上皮功能.
• 透性测试的验证,以评估屏障完整性.
• 成功的独立刺激和从上皮的两侧取样.
• 高质量的成像和RNA分析用于详细的表征.

结论:

• 开发的协议允许使用人类和小鼠器官创建功能性肠道器官芯片.
• 这种模型系统克服了光层的难以接近性,保留了肠道上皮的关键特征.
• 该平台促进了肠道生理学,药物透性和疾病建模的先进体外研究.