新的CRISPR-Cas-powered笔侧测试用于东海岸发烧

科学领域:

• 兽医寄生虫学 兽医寄生虫学
• 分子诊断学 分子诊断学
• 控制畜牧业疾病的控制

背景情况:

• 由Theileria parva引起的东海岸热病 (ECF) 是撒哈拉以南非洲地区传播的致命牛病,每年造成超过3亿美元的损失.
• 目前对T. parva的诊断方法缺乏对低级感染的敏感性,并且在资源有限的环境中通常是不切实际的.
• 需要一种可在现场部署的诊断测试,用于早期和准确地检测ECF.

研究的目的:

• 开发一种基于CRISPR-Cas12a的敏感和特定的Pen-side诊断工具,用于Theileria parva.
• 创建一个精简的,现场适用的测试,用于早期的护理点诊断牛的ECF.

主要方法:

• 开发一种针对T. parva. p104基因的CRISPR-Cas12a试验.
• 整合了20分钟的复合酶聚合酶放大 (RPA) 与60分钟的CRISPR-Cas12a反应.
• 使用FAM/生物素侧流带进行读取,并测试了各种原始配对和CRISPR-RNA.

主要成果:

• 基于p104的CRISPR-Cas12a试验显示出高灵敏度,检测到每三微升血液中只有一个感染的淋巴细胞.
• 该试验成功检测出八种不同的T. parva菌株.
• 没有观察到与其他Theileria物种的DNA交叉反应,包括T. mutans和T. lestoquardi.

结论:

• 一个现场适用的,基于CRISPR-Cas12a的T. parva诊断工具已经成功开发出来.
• 这种测试提供了对牛的ECF的敏感,具体和快速的护理点诊断.
• 该工具有潜力显著改善流行地区ECF的治疗和控制.