在小鼠和人类神经元中测试神经的调节分泌的高通量试验
Urszula Baginska1, Ganna Balagura2, Ruud F Toonen1
1Department of Functional Genomics, Faculty of Exact Science, Center for Neurogenomics and Cognitive Research, VU University Amsterdam and VU Medical Center, Amsterdam, The Netherlands.
The Journal of biological chemistry
|April 27, 2024
概括
一种新的NPY-Nanoluc测定有效地测量神经元中的密集核心囊泡 (DCV) 脱细胞. 这种高通量方法有助于发现神经系统疾病的治疗方法.
科学领域:
- 神经科学是一个神经科学.
- 细胞生物学 细胞生物学
- 生物化学 生物化学
背景情况:
- 神经是关键的大脑信号,调节许多功能.
- 神经的失调与神经系统疾病有关.
- 神经释放通过密集核心囊泡 (DCV) 脱细胞发生.
研究的目的:
- 开发一种新型的高通量试验,用于量化DCV细胞外.
- 用一个神经Y (NPY) -纳诺化酶 (Nanoluc) 仿真体作为记者.
- 为了验证测试在哺乳动物神经元中的敏感性和适用性.
主要方法:
- 为DCV货物创建了一个NPY-Nanoluc记者构造.
- 在神经元中验证了与内源性DCV标记物的记者局部化.
- 在动物和人类神经元中使用NPY-Nanoluc试验评估DCV细胞外.
- 测试的测定灵敏度和对 (Ca2+),RAB3和STXBP1/MUNC的依赖18.
主要成果:
- NPY-Nanoluc准确地报告了动物和人类神经元中的DCV外细胞形成.
- 该试验表明对脱极化,Ca2+,RAB3和STXBP1/MUNC18的依赖.
- NPY-Nanoluc显示了比现有的低通量试验更高的灵敏度.
- 记者成功地确定了DCV外细胞形成的调节器.
结论:
- NPY-Nanoluc测定是一种敏感的工具,用于研究哺乳动物神经元中的DCV外细胞.
- 这种试验适用于大规模的药理和基因组查.
- 它有可能开发用于中枢神经系统疾病的基于机制的治疗方法.
