开发一种10g/L的工艺,用于一种难以表达的多种类型抗体格式,使用整体工艺开发方法

科学领域:

• 生物技术是生物技术.
• 蛋白质工程是指蛋白质工程.
• 生物制药制造业 生物制药制造业

背景情况:

• 多特异性抗体格式,如基于T细胞受体 (BEAT) 抗体的抗体的双特异性参与,与传统单克隆抗体 (mAbs) 相比,存在表达挑战.
• 这些工程蛋白质的固有复杂性会导致表达度低,阻碍它们的治疗开发和制造.

研究的目的:

• 解决和克服与难以表达的双特异性双巴拉托普性BEAT抗体相关的表达限制.
• 开发一个强大的和可扩展的平台过程,以提高复杂的多特异性抗体的生产.

主要方法:

• 作为表达不良的根本原因,研究了子单元失衡.
• 优化信号和在单个基因矢量上使用双向量设计元素.
• 增强细胞群体选择,实施上游 (USP) 平台过程,并利用细胞培养温度变化.
• 开发了一种高密度播种工艺,用于强化细胞培养.

主要成果:

• 通过初始优化,对于难以表达的BEAT抗体,通过初始优化实现了高达6g/L的标位水平.
• 通过实施高密度播种过程,将BEAT抗体的标位提高到大约11g/L,这代表了十倍的改善.
• 成功地将开发的平台应用于三特异性抗体,达到10 g/L的标位水平.

结论:

• 综合分子生物学,细胞系发展,上游过程优化和过程强化,全面的平台过程有效地增强了具有挑战性的多特异性抗体的表达.
• 开发的策略为生产复杂抗体格式提供了可扩展的解决方案,为它们更广泛的治疗应用铺平了道路.