在单细胞悬浮中高通量,无标签检测DNA原始体,使用原始体FISH-Flow
Shana Alexander1, Wendy Xueyi Wang1,2, Chung-Yi Tseng1
1Institute of Biomedical Engineering, University of Toronto, Toronto, ON, M5S 3G9, Canada.
Small (Weinheim an der Bergstrasse, Germany)
|April 30, 2024
概括
一种名为origamiFISH-Flow的新方法,可以在单细胞中高吞吐量量化DNA纳米结构 (DN). 这种技术提高了检测灵敏度,并允许对DN细胞相互作用进行详细分析,用于生物应用设计.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 纳米技术 纳米技术
- 细胞生物学 细胞生物学
背景情况:
- 结构DNA纳米技术允许创建定制的纳米尺度设备,具有潜在的生物应用.
- 了解DNA纳米结构 (DN) 设计如何影响体外和体内细胞的相互作用至关重要,但其特征并不清楚.
- 现有的用于检测细胞中的DNA的方法,如光标签,在灵敏度和特异性方面存在局限性.
研究的目的:
- 扩展原始FISH技术,使用流细胞计来对单细胞悬浮中的DN进行高通量定量.
- 开发一种方法,OrigamiFISH-Flow,能够分析各种细胞类型的DN细胞相互作用,包括非粘附性免疫细胞.
- 提供一个敏感和定量工具,用于询问DN在生物系统中的吸收和分布.
主要方法:
- 为流细胞计分析 (origamiFISH-Flow) 调整了原始FISH技术.
- 在每秒10,000个细胞的速度下,在单细胞悬浮中对DNs的高通量化.
- 同时进行细胞类型和细胞状态的表征,同时使用DN检测和免疫染.
主要成果:
- 与传统的染料标签相比,origamiFISH-Flow显示了DN检测的信号噪声比率高出20倍.
- 该方法在低皮科莫拉度下成功识别出超过25倍的DN阳性细胞.
- 在多种细胞系和细胞中验证了DN吸收的概况,并在淋巴体器官中量化了体内DN积累.
结论:
- origamiFISH-Flow是一个强大的,高吞吐量工具,用于量化单细胞内DNA纳米结构.
- 这种方法显著提高了DN细胞相互作用研究的灵敏度和范围.
- origamiFISH-Flow为优化生物医学应用中的DNA纳米结构设计提供了宝贵的见解.
