基于CRISPR/Cas12a的增强型核酸定量检测,使用双乳液滴
Yang Zhang1, Hangrui Liu2, Yuta Nakagawa3
1School of Engineering, Faculty of Science and Engineering, Macquarie University, Sydney, NSW 2109, Australia; School of Mechanical and Manufacturing Engineering, University of New South Wales, Sydney, NSW, 2052, Australia.
Biosensors & bioelectronics
|April 30, 2024
概括
水-油-水双乳液滴为CRISPR/Cas12a核酸检测提供了增强的稳定性. 这种方法可以使用流细胞计进行准确的,高通量定量HPV18DNA等生物标志物.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 分子诊断学 分子诊断
- 微流体学 微流体学
背景情况:
- 滴滴微流体与CRISPR/Cas12a相结合,可以提供敏感的核酸检测.
- 传统的油中的水单溶液滴滴缺乏稳定性,无法进行准确的数字测定.
- 水-油-水双乳液滴提供了更好的稳定性和流量细胞计兼容性.
研究的目的:
- 为了比较单乳液 (SE) 和双乳液 (DE) 滴滴的性能,用于基于CRISPR/Cas12a的核酸量化.
- 在各种条件下评估SE和DE滴的稳定性.
- 为了证明DE滴对HPV18DNA的高通量,准确量化的实用性.
主要方法:
- 对SE和DE滴滴稳定性的比较分析 (尺寸变化,合并,内容相互作用).
- CRISPR/Cas12a试验用于定量检测18型人类乳头瘤病毒 (HPV18) DNA.
- 集成DE滴与流细胞计,用于高通量分析.
主要成果:
- 与SE滴相比,DE滴表现出更高的稳定性.
- 配合CRISPR/Cas12a和流细胞计的DE滴滴平台使HPV18DNA的高通量和高精度量化成为可能.
- 证明了使用DE滴来绝对量化核酸生物标记物的可行性.
结论:
- 与单个乳液滴相比,水-油-水双重乳液滴是基于CRISPR/Cas12a的核酸检测的更稳定,更可靠的平台.
- 开发的DE滴滴CRISPR/Cas12a流细胞计系统为核酸生物标志物的高通量,绝对量化提供了一种可靠的方法.
- 这项技术对敏感和准确的分子诊断具有前景.
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