量身定制的α-Glucans通过通过道-裂活性中心互转换工程α-Glucanotransferases的渐进性
Jingjing Dong1,2,3, Maher Abou Hachem4, Yanli Wang5
1State Key Laboratory of Food Science and Resources, Jiangnan University, Wuxi, Jiangsu 214122, China.
Journal of agricultural and food chemistry
|May 3, 2024
概括
研究人员通过改变活性部位结构,控制多糖体大小和类型,为生物技术应用设计了新的α-葡萄糖转移酶.
科学领域:
- 酶学和葡萄糖化学 酶学和葡萄糖化学
- 结构生物学 结构生物学
- 生物技术是生物技术.
背景情况:
- 多糖的功能与大小有关,由转移酶过程性决定.
- 具有道活性中心的甘氨酸化酶 (GHs) 具有较高的过程性.
- GH70家族α-葡萄糖转移酶,Limosilactobacillus reuteri 121 GtfB (Lr121 GtfB),也具有一个道结构.
研究的目的:
- 为了研究GH70α-葡萄糖转移酶中的过程性分子基础.
- 设计具有量身定制产品配置的新型α-葡萄糖转移酶.
- 为了探索GH70酶的进化多样化.
主要方法:
- 来自L. reuteri N1的新型4,6-α-葡萄糖转移酶 (LrN1 GtfB) 的表征,具有开放裂活性中心.
- 基于晶体结构的LRN1 GtfB和LR121 GtfB之间的循环交换工程.
- 分析活点道/裂结构对酶过程性和基质偏好的影响.
主要成果:
- LrN1 GtfB合成了最小的 (α1 → 4) -α-glucans与间隔的 (α1 → 6) 链接.
- 工程澄清了循环介导结构在确定过程性方面的作用.
- 通过结构修改实现了产品尺寸和基质特异性的定制.
结论:
- 活跃中心架构 (道与裂) 显著影响α-葡萄糖转移酶的过程性.
- 结构工程提供了一种控制生物技术用途α-葡萄糖合成的方法.
- 这项研究提供了关于GH70酶进化和工程潜力的见解.
