敏感,精确的指纹分析,用于对Bacillus Calmette-Guérin多糖和核酸分离物的单糖分析

科学领域:

• 分析化学 分析化学
• 生物化学 生物化学
• 药理学 药理学是指药理学的学科.

背景情况:

• 甲基卡尔梅特-盖林多糖和核酸 (BCG-PSN) 是一个重要的免疫调节剂.
• 准确量化多糖化合物成分,特别是诸如曼诺和葡萄糖之类的单糖,对于BCG-PSN质量控制至关重要.
• 现有的分析方法可能缺乏常规分析所需的灵敏度,精度或效率.

研究的目的:

• 开发和验证一种灵敏和精确的二极管阵列检测 (HPLC-DAD) 高性能液态染色学方法,用于分析BCG-PSN中的单糖含量.
• 建立一个HPLC指纹方法来评估BCG-PSN分离物的组成相似性.
• 应用经过验证的方法用于BCG-PSN粉末和注射配方的常规质量控制.

主要方法:

• 建立和验证一个HPLC-DAD方法,使用BCG-PSN.的酸水解后的前列PMP导化.
• 使用HPLC指纹分析分析的单糖化合物组成分析.
• 确定曼和葡萄糖量化的线性,回收和精度 (日内和日间RSD).
• 对染色学参数变化的方法稳定性和强度的评估.

主要成果:

• 开发的HPLC-DAD方法表现出良好的线性 (R2>0.99) 和高回收 (93-105%) 的曼诺糖和葡萄糖.
• 获得了极好的精度,日内RSD<2.5%和日间RSD<4.3%.
• 在HPLC指纹分析中,在22批BCG-PSN粉末和17批BCG-PSN注射中发现了很高的相似性 (粉末的相似度指数高达0.999,注射的0.998),证实了一致的组成.

结论:

• 经过验证的HPLC-DAD方法与前列PMP衍生是快速,有效,可视和准确的,用于确定BCG-PSN中的单糖含量.
• 该方法适用于BCG-PSN粉末和注射形式的多糖的质量控制和分析.
• 在HPLC指纹中的高度相似性表明分析的BCG-PSN批次的制造和质量一致.