构建和运行一个定制的3D,多色,单分子定位显微镜
Rory M Power1, Aline Tschanz2, Timo Zimmermann3,2
1EMBL Imaging Centre, EMBL Heidelberg, Heidelberg, Germany. rory.power@embl.de.
Nature protocols
|May 3, 2024
概括
研究人员可以构建自己的高端单分子局部化显微镜 (SMLM) 系统. 本指南详细介绍了定制的SMLM设置,降低了成本并增加了先进生物成像的可访问性.
科学领域:
- 生物物理学的生物物理.
- 光学显微镜的使用方法
- 纳米技术纳米技术
背景情况:
- 单分子定位显微镜 (SMLM) 提供高分辨率的生物成像.
- 商业SMLM系统的开发成本昂贵且复杂,限制了可访问性.
- 需要具有成本效益,可定制的SMLM解决方案.
研究的目的:
- 为建立一个定制的,高端的SMLM设置提供一个全面的指南.
- 详细说明自定义SMLM的组装,对齐,软件集成和操作.
- 为了使研究人员能够在他们的实验室中建立先进的SMLM能力.
主要方法:
- 对光路线对齐和硬件/软件集成的详细说明.
- 使用已知结构的试验和生物样本的验证程序.
- 关于定制 SMLM 的故障排除和性能基准测试的指导.
主要成果:
- 一个功能性,高端的SMLM系统可以用$95,000-$180,000建造.
- 建筑和优化需要经验丰富的建筑师大约4-8个月.
- 该指南有助于获取高质量的3D,多色超分辨率图像.
结论:
- 构建一个定制的SMLM是可行的,并且比商业选择便宜得多.
- 本指南使研究人员能够实施先进的SMLM进行生物发现.
- 通过开源,定制的系统,民主化对高分辨率显微镜的访问.
