将酸处理和微波消化进行比较,以从生物工艺样本中提取金属的效率
Adil Mohammad1, Chikkathur N Madhavarao1
1Division of Product Quality Research, Office of Testing and Research, Office of Pharmaceutical Quality, Center for Drug Evaluation and Research, Food and Drug Administration, 10903 New Hampshire Ave., Silver Spring, MD, 20993, USA.
Analytical biochemistry
|May 4, 2024
概括
与简单的酸处理 (TNA) 相比,封闭容器消化 (CVD) 从生物反应器样本中提供更优质的金属提取. 这种方法增强了对治疗性蛋白质生产的关键金属的分析.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 分析化学 分析化学
- 生物工艺工程 生物工艺工程
背景情况:
- 金属离子作为酶共因子至关重要,影响生化反应动力学.
- 准确的金属离子量化对于优化治疗性蛋白质生产和像糖化等质量属性至关重要.
- 在生物工艺中可靠的金属分析取决于有效的样本准备技术.
研究的目的:
- 为了比较两种不同的样品制备方法在生物反应器培养基中进行金属分析的效率.
- 为了评估酸处理 (TNA) 与各种金属离子的封闭容器消化 (CVD) 的提取效率.
- 为生物制剂生产中全面的金属分析提供方法的清晰度.
主要方法:
- 诱导合等离子体质谱法 (ICP-MS) 用于金属量化.
- 两种样品制备方法进行了比较: (i) 用2%的酸 (TNA) 进行简单稀释, (ii) 用5%的酸进行微波辅助封闭容器消化 (CVD).
- 对生物反应器超浮和细胞颗粒样本的提取效率进行了评估.
主要成果:
- CVD显示 (Ca) 和铜 (Cu) 的提取产量显著更高 (约. 30%) 和 (Ni) (大约30%) 的含量. 65%) 在上游生物样本中.
- 对于细胞颗粒,CVD改善了铁 (Fe) 的提取 (约. 65%), (Zn) (大约65%), (Zn) (大约65%), (Zn) (大约65%), (Zn) (大约65%), (Zn) (大约65%), (Zn) (大约65%), (Zn) 20%), (Co) (大约) 的使用量. 60%),以及Ni (大约) 的使用. 45%) 的情况.
- 对于其他量化的金属,酸处理 (TNA) 更有效,程序差异一般低于10%.
结论:
- 封闭容器消化 (CVD) 是一种更有效的样品制备技术,用于从生物反应器样品中提取特定的必需和微量金属.
- 在TNA和CVD之间做出选择取决于目标金属和样本矩阵 (超级体与细胞颗粒).
- 标准化和优化的金属分析方法对于生物制造中的持续监测和控制至关重要.
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