在vivo中输送球形和圆柱形在体外复合的病毒样颗粒,含有相同的自我放大mRNA

科学领域:

• 生物技术是生物技术.
• 分子生物学分子生物学
• 纳米技术纳米技术

背景情况:

• 使者RNA (mRNA) 疗法,以COVID-19疫苗为例,显示出显著的承诺.
• 之前的研究探讨了通过球形和圆柱形病毒样粒子 (VLP) 传递的自我放大mRNA.

研究的目的:

• 为了比较球形 (CCMV) 和圆柱形 (TMV) VLPs在输送自我放大mRNA方面的有效性.
• 评估包装在不同VLP几何形状中的mRNA的细胞吸收和蛋白质表达.
• 评估植物VLP作为一种in vivomRNA输送系统的潜力.

主要方法:

• 在体外组装自放大mRNA (与Nodamura病毒RNA依赖RNA聚合酶融合) 成为CCMV和TMVVLP.
• 通过光和化学发光,用包装的mRNA感染培养细胞进行表达分析 (EYFP, luciferase).
• 使用定量实时PCR对mRNA输送的量化,并通过共聚焦显微镜确认细胞吸收.
• 在小鼠的体内研究使用脚注射和光成像.

主要成果:

• 无论是CCMV还是TMV VLPs,都成功地将自我放大的mRNA输入培养细胞,从而导致蛋白质的表达.
• 定量分析证实了两种VLP类型的细胞吸收和基因表达水平.
• 在小鼠体内成像显示,在VLP注射后,增强黄色光蛋白 (EYFP) 在排水淋巴结中表达强烈.

结论:

• 来自植物的病毒样颗粒 (CCMV和TMV) 是有效的携带者,可以将mRNA基因传递给免疫细胞.
• 包装在这些VLP中的自我放大mRNA显著增强了蛋白质表达.
• 这些植物VLP系统为基于mRNA的基因治疗和疫苗开发提供了一个多功能平台,VLP的选择取决于RNA包装的效率.