开发,确认和应用一种种植的大肠杆菌过程控制生物来验证Salmonella enterica serovar Typhi环境监测方法

科学领域:

• 环境微生物学环境微生物学
• 分子诊断学 分子诊断学
• 公共卫生监督是对公共卫生的监督.

背景情况:

• 沙门氏菌 (Salmonella enterica serovar Typhi (S. Typhi)) 导致伤寒热,这是一个重大的全球健康问题.
• 通过血培养进行临床诊断在资源有限的环境中具有挑战性.
• 废物影响水域的环境监测提供了一个补充方法,但方法验证很困难.

研究的目的:

• 开发和评估一种新型的过程控制生物 (PCO) 作为验证S. Typhi环境监测方法的生物安全替代品.
• 评估PCO在废水中的各种度技术中的性能.
• 测试PCO在来自特有地区的真实环境样本中的有效性.

主要方法:

• 对S Typhi staG基因的修改PCR扩增体被克隆到大肠杆菌中,以创建多重qPCR试验.
• 该试验包含了类型炎原剂的目标区域和一个非编码的内部探针,在没有抑制的情况下区分目标.
• 在实验室和现场环境中,PCO使用过器盒,重新循环摩尔扫描仪,膜过和微分离心仪进行了测试.

主要成果:

• 多重qPCR试验成功地区分了伤寒和对照目标,没有交叉反应或抑制.
• 在所有测试度方法中,在100%的复制品中检测到PCO,种子为10 CFU/mL和100 CFU/mL.
• PCO在各种方法中显示出一致的量化周期 (Cq) 值,并在印度和马拉维的废水样本中成功检测到.

结论:

• 开发的PCO是验证S. Typhi环境监测方法的可靠和有效工具.
• 这种代理生物体有助于精确评估基于水的伤寒发烧检测的性能,特别是在资源较低的地区.
• PCO提高了对S. Typhi环境监测的可靠性,有助于改善公共卫生监测.