超结构膨胀显微镜 (U-ExM) 的小鼠和人类脏,用于分析亚细胞结构

科学领域:

• 生物医学成像技术 生物医学成像技术
• 细胞生物学 细胞生物学
• 历史学 历史学 历史学

背景情况:

• 扩展显微镜 (ExM) 提供了细胞超结构的超分辨率成像.
• 现有的ExM协议没有针对复杂的脏组织架构进行优化.
• 对样品的高分辨率分析对于了解脏疾病至关重要.

研究的目的:

• 为脏组织开发和验证一个简化的超结构扩展显微镜 (U-ExM) 协议.
• 为了优化同位素扩张和脏细胞和细胞外结构的保存.
• 为了证明U-ExM在分析不同部件方面的实用性.

主要方法:

• 针对脏组织建立了一个逐步的U-ExM协议.
• 实施了关键的修改,以实现最佳的组织扩张和结构保存.
• 用细胞类型,细胞骨和细胞外基质的标记物进行免疫染.
• 图像检测是使用标准宽场或共聚焦显微镜进行的.

主要成果:

• 该协议成功实现了组织的同位素扩张.
• 证明了亚细胞和细胞外结构的保存,包括中心细胞和乳毛细胞.
• U-ExM有效地可视化了细胞骨元素和细胞类型特定的标记物.
• 这种方法在小鼠和人类脏样本中被证明是稳健的,其固定度各不相同.

结论:

• 该U-ExM协议提供了一种简单,具有成本效益的方法,用于对脏组织进行高度详细的分析.
• 它适用于临床前和临床脏样本.
• 该技术增强了使用常规显微镜的细胞生物学和病理学的研究.