针对COVID-19的色度测定RT-LAMP诊断试验的冷化协议的开发和评估
Nayra Oliveira Prado1, Anelis Maria Marin1, Larissa Araujo Lalli1
1Laboratory for Applied Science and Technology in Health, Carlos Chagas Institute, Oswaldo Cruz Foundation (Fiocruz), Prof. Algacyr Munhoz Mader 3775 Street, Curitiba, 81350-010, Brazil.
Scientific reports
|May 8, 2024
概括
用于色度逆转录循环介导异热放大 (RT-LAMP) 试验的试剂的冷化使SARS-CoV-2检测的室温储存和运输成为可能. 这种优化的套件保持了稳定性和诊断准确性,提高了分子诊断的可访问性.
科学领域:
- 分子诊断学 分子诊断
- 生物技术是生物技术.
- 病毒学 病毒学
背景情况:
- 分子诊断对于疾病检测至关重要,在SARS-CoV-2大流行期间,基于核酸的方法如RT-LAMP获得了突出地位.
- RT-LAMP试剂的可热性需要冷链基础设施,限制广泛分布和增加成本.
- 优化试剂稳定性对于可访问和具有成本效益的分子诊断套件至关重要.
研究的目的:
- 开发用于检测SARS-CoV-2的色度RT-LAMP试剂的冷化协议.
- 为了确定在室温下稳定试剂的最佳辅助剂.
- 评估冷化试验的稳定性,灵敏性和特异性.
主要方法:
- 开发RT-LAMP试剂的冷化协议.
- 选辅助剂,包括PEG 8000和三糖,以确定最佳的稳定条件.
- 在室温下测试冷化试剂的稳定性,长达28天.
- 评估用于检测SARS-CoV-2的冷化RT-LAMP试验的分析和诊断灵敏度和特异性.
主要成果:
- 成功开发了一种冷化方案,其中包括5%的PEG 8000和75mM的三醇.
- 优化的冷化试剂在室温下至少在28天内表现出稳定性.
- 该试验实现了分析灵敏度为83.33%,诊断灵敏度和特异性为90%的SARS-CoV-2检测.
- 性能与RT-qPCR可比,特别是在具有高病毒载荷的样本中.
结论:
- 热化提供了一种可行的解决方案,以克服RT-LAMP试验的冷链限制.
- 开发的协议可以在室温下储存和运输SARS-CoV-2色度RT-LAMP套件.
- 这一进步提高了COVID-19检测分子诊断的可访问性和成本效益.
