风暴超分辨率可视化自组装的gpfd伴侣超结构在methanocaldococcus jannaschii中
Hee-Jeong Cha1, Changdong He2, Dominic J Glover3
1Department of Chemical and Biomolecular Engineering, University of California─Berkeley, Berkeley, California 94720, United States.
Nano letters
|May 9, 2024
概括
研究人员使用3D-STORM显微镜在古生物中可视化了马前 (γPFD) 丝. 这项技术揭示了这种独特的伴侣蛋白的纳米结构和细胞分布.
科学领域:
- 显微镜的使用方法
- 结构生物学 结构生物学
- 古代生物生物学 古代生物生物学
背景情况:
- 马前蛋白 (γPFD) 是一种独特的伴侣蛋白,在热爱的古生物Methanocaldococcus jannaschii中被发现.
- 众所周知,gPFD在体外可以自我组装成纤维,此前通过电子显微镜技术可视化.
- 了解gpfd的体内结构和局部化对于阐明其细胞功能至关重要.
研究的目的:
- 通过超分辨率显微镜,在体外和体内分辨出玛前丁 (γPFD) 的超结构.
- 确定 Methanocaldococcus jannaschii 细胞内的 γPFD 纤维的细胞分布和组织.
- 建立3D-STORM作为研究纳米级考古组件的可行方法.
主要方法:
- 使用三维随机光学重建显微镜 (3D-STORM) 进行高分辨率成像.
- 采用CF647NHS标签,用于在试验室中可视化纯化的γPFD丝和捆.
- 实施了3xFLAG标记的 γPFD菌株的免疫光标记,用于M. jannaschii细胞内的体内成像.
主要成果:
- 实现了大约20纳米的分辨率,使单个光分子的精确定位成为可能.
- 在试管体内成功地可视化了纯化的 γPFD 的丝状和捆绑结构.
- 证明了M. jannaschii细胞内有丝状 γPFD 结构的广泛分布,与DNA共定位.
结论:
- 3D-STORM显微镜提供了前所未有的纳米分辨率,用于在体外和体内可视化gpfd超结构.
- γPFD在M. jannaschii细胞内形成了广泛的丝状结构.
- 这项研究为使用超高分辨率成像技术研究古生物和其他微生物中的纳米结构开辟了新的途径.
