在细胞培养收获中使用2D ProA CEX MS进行mAbs的titer和基于电荷的异质性多属性监测
Deepika Sarin1, Sunil Kumar1, Anurag S Rathore1
1Department of Chemical Engineering, Indian Institute of Technology, Delhi, Hauz Khas, New Delhi, 110016, India.
Talanta
|May 15, 2024
概括
一种新的二维液态色谱-质谱法简化了单克隆抗体 (mAb) 分析. 这种高效的工作流程只需15分钟即可同时进行标位和电荷变异估计,从而改善生物制药开发.
科学领域:
- 生物制药开发 生物制药开发
- 分析化学 分析化学
- 质谱测量质量谱测量
背景情况:
- 对单克隆抗体 (mAb) 异质性的严格监测对于生物治疗的安全性和有效性至关重要.
- 目前的方法涉及使用非挥发性溶剂进行漫长的多步骤分析,阻碍了直接质谱学合.
- 传统的单维方法需要对标位和电荷变量进行单独分析,最长需要90分钟.
研究的目的:
- 开发一种精简的单一工作流方法,用于对mAbs.的同时标位和电荷变量分析.
- 在生物制药开发中提高mAb异质性监测的效率.
- 为了实现与质谱仪的直接合,以更快地识别变体.
主要方法:
- 开发一种本土的二维液态色谱 (2DLC) 质谱法.
- 在第一个维度中利用蛋白质A色谱来估计标位.
- 使用二维的阴离子交换色谱 (CEX) 用于使用挥发性盐进行电荷变异分析.
主要成果:
- 2DLC方法在单个工作流程中实现了直接标位和充电变量估计.
- 充电变量配置文件与传统方法相似.
- 分析时间缩短到15分钟,以大规模识别每个变种.
- 成功分离了六种电荷变体,并证明了从5μg到160μg的线性.
- 对mAb innovator和四种生物相似药物进行了验证,证实了生物相似性研究的适用性.
结论:
- 2D ProA CEX MS 方法在 mAb 分析效率方面取得了显著的进步.
- 这种方法可以快速准确地监测关键质量属性.
- 该工作流适用于常规生物制药开发和生物相似性评估.
