在直通道微芯片上应用在线样品预度通过大容量双重预度通过同位电泳和堆叠 (LDIS)

科学领域:

• 分析化学 分析化学
• 分离科学 分离科学
• 生物化学 生物化学

背景情况:

• 微芯片电泳 (MCE) 提供了小型化的分离能力.
• 提高MCE的检测灵敏度和峰值形状仍然是一个关键的挑战.
• 在线样品预度技术对于提高MCE性能至关重要.

研究的目的:

• 为MCE开发和应用一种新型的大容量双重预缩方法,即通过同位电泳和堆叠 (LDIS) 方法.
• 在微通道中研究引入领电解质插头的高效方法.
• 评估LDIS在改善各种分析物的灵敏度和峰值形状方面的有效性.

主要方法:

• 通过将大容量样本堆叠与电式流量 (LVSEP) 和瞬态同位电泳 (tITP) 的合来实现LDIS.
• 开发了一种简单的方法,通过调整储液位来注入领电解质 (LE) 插头.
• 用LVSEP和tITP进行连续丰富的逆极性电压.

主要成果:

• 与传统LVSEP相比,使用LDIS的标准染料的灵敏度增强因子 (SEF) 和不对称性因子得到了显著改善.
• 证明使用粘性运行缓冲器与选聚合物进一步提高了SEF和分离效率,特别是对于生物聚合物.
• 成功地应用LDIS来分析寡糖和蛋白质,为马尔托和牛奶素获得高SEF.

结论:

• LDIS是一种非常有效的MCE在线预缩技术,显著提高了检测灵敏度和峰值质量.
• 开发的LE插头注射方法很简单,不需要复杂的设备.
• 在分析复杂的生物样本 (如MCE中的寡糖和蛋白质) 方面,LDIS具有广泛的适用性.