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Updated: May 5, 2026

Isolation of Murine Lymph Node Stromal Cells

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Published on: August 19, 2014

分离协议影响从新生儿淋巴结中分离出来的淋巴细胞和髓状细胞群的表型

Jarina P DaMata^1,2, Amanda E Zelkoski¹, Paula B Nhan^1,2

¹Laboratory of Infectious Diseases and Host Defense, Department of Pediatrics, Uniformed Services University of Health Sciences (USUHS), Bethesda, MD, United States.

Frontiers in immunology

|May 17, 2024

概括

在新生儿和成年小鼠中研究免疫细胞与淋巴结 (LN) 的隔离表明,虽然细胞产量和活力在三个解离方法中是相似的,但酶性消化改变了关键的免疫细胞标记物,影响了实验结果.

科学领域:

免疫学免疫学免疫学
细胞生物学细胞生物学
流动细胞计量 (Flow Cytometry) 是一种流动细胞计.

背景情况:

新生儿和成年人之间的免疫细胞频率和表型不同,需要针对特定年龄的免疫反应研究.
淋巴结 (LN) 对于量化这些与年龄相关的免疫差异至关重要.
组织加工方法可以显著影响免疫细胞分析,可能影响实验结果.

研究的目的:

为了比较三种不同的解离协议对来自小鼠淋巴结的免疫细胞隔离的影响.
评估这些协议如何影响新生儿和成年小鼠呼吸后同位素病毒 (RSV) 感染的细胞产量,活力和表型/成熟标志物.

主要方法:

对比了三个解离协议:酶消化,与DNase I的机械解离,以及密度梯度分离的机械解离.
分析了新生儿和成年小鼠肺排水淋巴结的免疫细胞,在鼻内RSV感染后两天.
使用流细胞计评估细胞产量,活力和表现的表型和激活标志物.

主要成果:

这三种解离协议都在新生儿和成人淋巴结中产生了可比的细胞数量和活力.
与机械方法相比,酶化消化并没有增加传统树突细胞和巨细胞的产量.
酶性消化显著改变了关键血统和激活标记物的平均光强度.

结论:

分离协议对从新生儿和成人淋巴结中分离出来的免疫细胞的数量和活力产生类似的影响.
酶性消化可以影响免疫细胞标记物的测量表达水平,可能会影响下游实验解释.
仔细选择组织解离方法对于准确描述免疫细胞群体至关重要,尤其是在比较年龄组或实验条件时.

关键词:

酶性消化酶性消化淋巴结的淋巴结是指淋巴结的淋巴细胞淋巴细胞机械分离是指机械分离.骨髓状细胞是骨髓状细胞的组成部分.新生儿小鼠的新生儿小鼠一个单细胞悬浮液悬浮液

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Cell separation was first achieved in 1964 by S. H. Seal, who separated large tumor cells from the smaller blood cells using filtration. Two years later, Pohl and Hawk performed experiments on how cells respond differently to a nonuniform electric field based on the cell type. Such observations were the inception of cell separation methods, which allow isolating a single cell type from a heterogeneous sample.