在实验室中选择DNA体对抗葡萄球菌肠毒素A的选择
Ricardo Oliveira1,2,3, Eva Pinho4,5,6, Maria Margarida Barros4
1INIAV - National Institute for Agrarian and Veterinarian Research, Rua dos Lagidos, Vairão, 4485-655, Vila do Conde, Portugal. ricardo.oliveira@iniav.pt.
Scientific reports
|May 18, 2024
概括
开发了DNA吸管器来检测葡萄球菌肠毒素A (SEA),这是食物中毒的常见原因. 这些体对创建用于检测食品样本中SEA的新诊断工具充满希望.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 分子诊断学 分子诊断学
- 食品安全 食品安全
背景情况:
- 葡萄球菌肠毒素A (SEA) 是葡萄球菌食物中毒 (SFP) 爆发的主要原因.
- 作为单链核酸分子的aptamers,在诊断应用中为抗体提供了一个有希望的替代品.
研究的目的:
- 选择和表征具有对葡萄球菌肠毒素A (SEA) 高 afinity 的 DNA aptamers.
- 评估这些体的潜力,以开发用于SEA检测的诊断工具.
主要方法:
- 通过指数式丰富的连接体系统进化 (SELEX) 用于对SEA进行DNA吸附体的选择.
- 磁珠用于目标固定,定量PCR (qPCR) 监测了序列丰富.
- 下一代测序 (NGS) 确定了数以百万计的aptamer候选者,并进一步表征了高亲和度序列.
主要成果:
- 选择了一个具有13.36 ± 18.62 nM的解离常数 (KD) 的DNA体.
- 随着温度的增加,aptamer亲和力下降.
- 选择的体成功检测出100 ng的SEA在横流试验,最小的数量导致食物中毒.
结论:
- DNA 吸附体对识别和检测SEA.有效.
- 鉴定出特征的体表现出开发对SEA敏感和特定的诊断工具的潜力,这对食品安全至关重要.
