在表达mCherry标记修饰特异性细胞内抗体的敲入小鼠中可视化素H4K20me1

科学领域:

• 表观遗传学和分子生物学
• 细胞生物学 细胞生物学
• 遗传学 遗传学 是一个

背景情况:

• 包括H4K20me1在内的质子修饰对于细胞周期进展和基因调节等动态细胞过程至关重要.
• H4K20me1的水平在细胞周期中波动,并且在异性染色质中发现,例如不活跃的X染色体.
• 在活细胞中追踪这些动态表观遗传标记对于理解发育和疾病至关重要.

研究的目的:

• 开发一种基因编码的探针,用于实时可视化活细胞中素H4 Lys20单甲基化 (H4K20me1).
• 为了生成和表征表达H4K20me1特异性细胞内抗体 (薄荷体) 的实验小鼠.
• 评估H4K20me1-mintbody探头在追踪体内表观遗传变化的实用性.

主要方法:

• 通过将mCherry标记的H4K20me1-mintbody编码序列插入Rosa26位点,生成敲入小鼠.
• 在敲入小鼠中,H4K20me1-mintbody探针的无处不在表达.
• 分析探头表达,组织分布和局部化在各种组织和发育阶段,包括胚胎和精子生成期间.

主要成果:

• 表达H4K20me1-mintbody探针的试验小鼠发育正常,并且是肥沃的,表明对发育没有不良影响.
• 核光被观察到各种组织从敲进小鼠没有固定,证明探头的稳定性和可访问性.
• H4K20me1-mintbody探针显示,在发育胚胎和XY体中,不活跃的X染色体在精子生成过程中得到丰富,验证了其特异性.

结论:

• 开发的H4K20me1-mintbody探头是跟踪活细胞中H4K20me1的动态变化的宝贵工具.
• 敲入鼠标模型提供了一个强大的系统,用于h4k20me1.1.的体内体质化学分析.
• 这项技术有助于进一步研究H4K20me1在表观遗传调节,细胞循环和发育中的作用.