具有成本效益的内部COVID-19逆转录-聚合酶连锁反应测试,使用酵母衍生的Taq聚合酶
Mahmoud Zhra1, Aljohara Al Saud1, Maha Alzayer1
1Department of Biochemistry and Molecular Medicine, College of Medicine, Alfaisal University, Riyadh, Saudi Arabia.
Annals of thoracic medicine
|May 20, 2024
概括
再组合酵母Taq聚合酶为COVID-19RT-PCR测试提供了一个具有成本效益的替代方案. 这种未经净化的酶提供了可比的灵敏度和高特异性,简化了测试套件的生产,以便更广泛地访问.
科学领域:
- 分子生物学分子生物学
- 生物技术是生物技术.
- 病毒学 病毒学
背景情况:
- 可靠的COVID-19测试仍然至关重要,特别是在未来的流行病和资源有限的环境中.
- 标准RT-PCR方法面临挑战,包括酶可访问性和DNA污染,影响测试准确性.
- 开发替代酶来源对于强大的诊断能力至关重要.
研究的目的:
- 在酵母中产生重组Taq聚合酶.
- 评估未净化酵母Taq聚合酶在多重RT-PCR检测中检测SARS-CoV-2的性能.
- 评估酵母衍生Taq聚合酶的成本效益和可扩展性,用于COVID-19诊断.
主要方法:
- 重组Taq聚合酶在酵母细胞中得到表达.
- 含有Taq聚合酶的原始酵母溶解酸被用于多重RT-PCR试验.
- 该试验针对SARS-CoV-2的RNA依赖RNA聚合酶 (RdRP) 和N基因,其中人类核糖酶P作为内部控制.
主要成果:
- 未净化酵母Taq聚合酶的灵敏度与商业和细菌Taq聚合酶相提并论,用于检测RdRP和N基因.
- 酵母酶为N基因实现了100%的特异性.
- 对RdRP基因的特异性与细菌Taq聚合酶相比.
结论:
- 未净化复合酵母Taq聚合酶是一种有希望的,具有成本效益的选择,用于内部COVID-19RT-PCR测试.
- 消除净化步骤简化了RT-PCR套件的生产,提高了可访问性和可扩展性.
- 这种方法对于资源有限的环境和为未来的流行病做好准备尤其有益.
