从人类肌肉间脂肪组织和下游单核RNA测序中分离核
Line O Elingaard-Larsen1, Katie L Whytock2, Adeline Divoux2
1Translational Research Institute, AdventHealth; Steno Diabetes Center Copenhagen.
Journal of visualized experiments : JoVE
|May 20, 2024
概括
肌肉间脂肪组织 (IMAT) 对于了解代谢健康至关重要. 这项研究介绍了人类IMAT单核RNA测序的新协议,揭示了其细胞构成.
科学领域:
- 人类生理学 人类生理学
- 分子生物学分子生物学
- 脂肪组织研究研究脂肪组织研究.
背景情况:
- 肌肉间脂肪组织 (IMAT) 缺乏研究,尽管它与衰老,BMI和退行性疾病有关.
- 由于可访问性和处理挑战,了解IMAT的细胞组成和肌肉相互作用是有限的.
- 现有的单细胞测序方法与IMAT中富含脂质的脂肪细胞不兼容.
研究的目的:
- 开发和介绍一个强大的协议,用于核的隔离和库准备冷的人类IMAT.
- 为了使IMAT在单细胞分辨率下进行高维的转录基因分析.
- 为了促进IMAT细胞组成和生物功能的探索.
主要方法:
- 从冷的人类IMAT中隔离核的详细协议.
- 对单核RNA测序 (snRNA-seq) 进行优化的图书馆准备.
- 使用基于滴滴的方法,对成千上万个原子核进行分析.
主要成果:
- 成功地分离并准备了来自人类的核的图书馆. IMAT.
- 为IMAT展示基于滴滴的snRNA-seq方法.
- 该协议可以在IMAT中检测罕见和低丰度的细胞类型.
结论:
- 提出的协议克服了人类IMAT处理对snRNA-seq.的挑战.
- 这种方法提供了一个强大的工具来揭示IMAT的细胞格局.
- 进一步的研究现在可以探索IMAT在代谢和退行性疾病中的作用.


