基于小细胞外囊泡 (sEVs) 的基因传递平台用于细胞特异的CRISPR/Cas9基因组编辑

科学领域:

• 生物技术是生物技术.
• 纳米医学是一种纳米医学.
• 分子生物学分子生物学

背景情况:

• 作为药物输送系统,小细胞外囊泡 (sEV) 是一个有前途的药物输送系统.
• 当前的sEV应用在货物装载和准特异性方面面临挑战.

研究的目的:

• 开发一个基于sEV的模块化平台 (safeEXO),以高效和有针对性地提供基因编辑工具.
• 设计安全的EXO囊泡用于体外和体内CRISPR-Cas9传递和基因组编辑.

主要方法:

• 开发了模块化的safeEXO平台,设计为RNA-depleted.
• 将Cas9和指导RNA纳入安全的EXO囊中,用于CRISPR-RNP传递.
• 工程安全EXO囊泡与整合素alpha-6用于肺特定的向.
• 向小鼠用EMX1sgRNA注射了针对性的安全EXO-CAS-ITGA6囊泡,用于肺部基因编辑.

主要成果:

• 安全EXO车辆有效地将RNA和RNP复合体输送到细胞内.
• 安全EXO-CAS囊中介剂量依赖的CRISPR基因组编辑 in vitro和 in vivo.
• 向安全EXO-CAS-ITGA6囊泡增强了肺上皮细胞的吸收,并诱导了小鼠的肺特异性基因编辑.
• 在接受治疗的小鼠中没有观察到显著的毒性或免疫反应.

结论:

• 模块化的safeEXO平台是一种安全,可定位和有效的载体,用于输送核酸治疗药物.
• 基因工程生产细胞可以生产装有CRISPR机器的sEV,用于增强基因组编辑.
• 这个平台有潜力推进基于RNAi和CRISPR的人类疾病的治疗方法.