一种基于HPLC-SEC的囊性口腔炎病毒颗粒快速定量方法,以促进过程开发

科学领域:

• 生物技术是生物技术.
• 分析化学 分析化学
• 过程开发 过程开发

背景情况:

• 准确的病毒粒子 (VP) 量化对于生产用于治疗应用的VP至关重要.
• 目前的方法可能缺乏效率或需要标签,阻碍了过程开发.

研究的目的:

• 开发和描述一种无标签的方法来量化包装VPs.
• 为VP生产建立可靠的工艺性能指标.

主要方法:

• 使用尺寸排除染色学 (SEC) 与高性能液态染色学 (HPLC) 相结合.
• 采用紫外线 (UV) 检测用于量化和多角度光散射 (MALS) 进行表征.
• 优化了移动阶段,并使用牛血清白蛋白 (BSA) 来稳定样本,实现>97%的回收.

主要成果:

• 证明了高精度,<1%的可重复性和<3%的中间精度变化.
• 建立了一个广泛的线性范围 (7.08 × 10^8至1.72 × 10^11 VP/mL),LOD为7.72 × 10^7 VP/mL,LLOQ为4.20 × 10^8 VP/mL.
• 已验证的适用于加工中的样品.

结论:

• 开发的SEC-HPLC方法为VP量化提供了一个精确,高效和无标签的方法.
• 该方法支持基于病毒的疗法的过程开发,包括瘤性病毒疗法,疫苗开发和基因疗法.
• 测试的速度和最小的实践时间使同一天的结果更容易用于过程监测.