在CAR-T细胞制造中优化转染效率,通过多次管理基于脂质的纳米粒子
Francesca Giulimondi1, Luca Digiacomo1, Serena Renzi1
1Department of Molecular Medicine, Sapienza University of Rome, V.le Regina Elena 291, Rome 00161, Italy.
ACS applied bio materials
|May 22, 2024
概括
这项研究开发了一种使用多个基于脂质的纳米粒子管理的新型传染协议,以显著改善CAR-T细胞治疗的基因传递. 优化的阴脂积 (cLNP) 配方提高了转染效率和表达,而不会损害细胞活力,为改进的CAR-T制造铺平了道路.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 细胞和分子医学 细胞和分子医学
- 基因治疗 基因治疗
背景情况:
- 目前的CAR-T细胞疗法制造业面临的挑战是短暂的转染持续时间.
- 实现临床相关的转染效率 (TE) 仍然是一个重大障碍.
研究的目的:
- 为CAR-T细胞疗法开发和优化一种多次管理的基于脂质的纳米粒子 (LNP) 传染协议.
- 将TE提升到临床相关水平,同时保持细胞活力.
- 为了确定最佳的LNP配方用于CAR基因传递.
主要方法:
- 系统优化多次管理的LNP传染协议.
- 对可电离性脂质纳米粒子 (iLNPs) 和用于DNA封装的阴离性脂质组 (cLNP) 的评估.
- 同焦显微镜和先进的图像分析,以研究细胞吸收机制.
- 基于光的测定以确认CAR表达.
主要成果:
- 在Jurkat细胞中实现了一级大小的TE增加,持续超过两周,对细胞活力没有影响.
- 与iLNP相比,确定cLNP是CAR基因传递的优质配方.
- 通过巨细胞解剖,证明了cLNP在HEK-293细胞中的高效内化,从而增加了内体逃生.
- 使用cLNP系统确认了抗CD19CAR的成功表达.
结论:
- 多个LNP的管理提供了一种实际的方法来增强T细胞工程用于CAR-T疗法.
- 该cLNP配方显示了将其整合到CAR-T疗法生产管道中的巨大潜力.
- 进一步优化转染参数可能会提高TE和基因表达水平.
