基于CX3CR1和CCR2使用光记者和抗体对单细胞进行不一致的表型鉴定
Katrin Sommer1, Hilal Garibagaoglu2, Eva-Maria Paap1
1Department of Medicine 1, University Hospital Erlangen, Friedrich-Alexander-Universität Erlangen-Nürnberg, 91054 Erlangen, Germany.
Cells
|May 24, 2024
概括
针对小鼠单细胞子集的抗体染色可能不会准确地反映CX3CR1和CCR2的表达. 记者小鼠模型显示了差异,这表明仔细选择表型化策略对于免疫细胞研究至关重要.
科学领域:
- 免疫学 免疫学 免疫学
- 细胞生物学 细胞生物学
背景情况:
- 单细胞,巨细胞和树突细胞是重要的免疫细胞,参与恒温和炎症.
- 传统的小鼠单细胞分类依赖于Ly6C/CCR2和CX3CR1表面标记物,通常使用记者模型进行研究.
研究的目的:
- 挑战老鼠单细胞子集的传统分类.
- 研究抗体染色与CX3CR1和CCR2的记者基因表达的可靠性.
- 评估小鼠单细胞子集的表型化策略.
主要方法:
- 使用了Cx3cr1GFP和Ccr2RFP记者小鼠.
- 用验证的色合抗体对CX3CR1和CCR2进行了流细胞计.
- 将抗体染色结果与记者基因表达信号进行比较.
主要成果:
- 抗体染色显示,Ly6C高和Ly6C低单细胞之间的CX3CR1表达没有差异.
- 在Cx3cr1GFP小鼠中,报告者基因表达证实了CX3CR1和Ly6C之间的逆相关性.
- 通过抗体染色观察到差异性CCR2表面表达,但不是在Ccr2记者小鼠中.
结论:
- 对CX3CR1抗体染色用于小鼠单细胞表型的适用性是有限的.
- 在使用CCR2记者小鼠进行单细胞子集分析时,建议谨慎使用.
- 仔细选择表型化策略对于准确的小鼠单细胞子集表征至关重要.
