基于正交选择性记者的人类多能干细胞无痕基因组编辑协议
Yun Zhao1, Zihang Pan1, Zixuan Hong1
1Department of Physiology and Pathophysiology, School of Basic Medical Sciences, State Key Laboratory of Vascular Homeostasis and Remodeling, Peking University, Beijing 100191, China.
STAR protocols
|May 24, 2024
概括
这项研究引入了一种用于精确编辑人类多能干细胞 (hPSCs) 的新协议. 该方法使用可视化记者来有效地创建用于研究和治疗的转基因hPSC线.
科学领域:
- 干细胞生物学 干细胞生物学
- 基因组编辑 基因组编辑
- 再生医学是一种再生医学.
背景情况:
- 人类多能干细胞 (hPSCs) 对再生医学和疾病建模至关重要.
- 在hPSC中有效和精确的基因组编辑对于这些领域的进步至关重要.
研究的目的:
- 提出建立基因组编辑hPSC线条的详细协议.
- 通过使用新型报告员系统,能够创建具有特定遗传修饰的hPSC系.
主要方法:
- 构建具有可视化的直角选择性报道器的专用等离子体.
- 培养和电穿孔的hPSCs.
- 药物光双丰富用于选择编辑的细胞.
- 克隆查和全面的细胞系表征.
主要成果:
- 成功建立编辑的hPSC线路.
- 促进单基同基突变.
- 实现记者敲击用于精确的编辑验证.
- 在hPSCs中展示精确基因组编辑的可靠方法.
结论:
- 开发的协议为hPSCs的基因组编辑提供了强大的和高效的方法.
- 该方法支持为各种应用提供高质量的转基因hPSC产品线.
- 该协议提高了干细胞研究中精确基因组工程的能力.
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