如何在实验室实践中验证ELISA免疫分析的分析和临床性能. 以PCSK9作为一个例子
Tereza Vacková1, Antonín Jabor1, Zdenek Kubíček2
1Institute for Clinical and Experimental Medicine, Department of Laboratory Methods, Vídeňská 1958/9, 140 21 Praha 4, Czech Republic; Third Faculty of Medicine, Charles University, Ruská 87, 100 00 Praha 10, Czech Republic.
Journal of immunological methods
|May 26, 2024
概括
临床实验室必须验证制造商关于分析性能的声明. 这项研究发现基于ELISA的蛋白转化酶亚素/素9型 (PCSK9) 测量结果存在显著差异,突出显示需要先进的统计验证.
科学领域:
- 临床化学 临床化学
- 实验室医学 实验室医学
- 免疫测试开发 免疫测试的发展
背景情况:
- 制造商经常建议在临床实验室进行现场分析性能验证.
- 制造商的产品表中经常缺少详细的验证流程和完整的分析性能数据,特别是在免疫测试中.
研究的目的:
- 描述一个详细的方法,以验证一种ELISA方法,以测量蛋白转化酶亚素/素9型 (PCSK9) 的血度.
- 为了将制造商声称的分析性能与在实地实验室环境中获得的数据进行比较.
主要方法:
- 使用了人类自身蛋白转化酶9/PCSK9 Quantikine ELISA套件和质量控制解决方案.
- 使用DS2 ELISA阅读器测量PCSK9度,并使用ANOVA和R统计包分析数据.
- 根据CLSI EP15-A3协议进行统计分析;根据CLSI/IFCC C28-A3c的参考间隔进行检查.
主要成果:
- 在PCSK9 ELISA的制造商声明和常规临床实验室测量之间观察到显著的差异.
- 计算的CV可重复性在5.0%6.9% (ANOVA) 之间,而制造商声称的4.1%6.5%.
- 在实验室内不精确的CV (%) 范围为6.5%9.1% (ANOVA),而制造商声称的4.1%5.9%;回收率为105.5%121.8%.
结论:
- 使用PCSK9测量作为一个例子,验证ELISA分析性能的综合方法揭示了与制造商数据的差异.
- 该研究建议在实验室实践中使用更复杂的统计工具来验证分析性能.
- 这些差异凸显了诊断分析超出制造商规格的独立验证的重要性.
