从高剂量腺相关病毒9基因疗法中去除空体
William S Kish1, John Lightholder1, Tamara Zeković1
1Gene Therapy Process Development, Pfizer Inc., Morrisville, North Carolina, USA.
Biotechnology and bioengineering
|May 29, 2024
概括
阴离子交换染色学有效地减少了重组腺相关病毒血清型9基因疗法的空体. 与超离心法相比,这种可扩展的方法提高了产量,并简化了制造.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 基因治疗 基因治疗
- 生物加工是一种生物加工.
背景情况:
- 复合腺相关病毒9型血清 (rAAV9) 是一个有前途的基因治疗载体.
- 高剂量的rAAV9会给安全和制造带来挑战.
- 减少空体 (ECs) 对rAAV9的疗效至关重要,但由于具有相似的生物物理性质,难以实现.
研究的目的:
- 开发一种可扩展的染色学方法,用于减少rAAV9产品中的EC.
- 取代了繁重且难以扩展的超离心法 (UC) 过程.
主要方法:
- 阳离子交换 (AEX) 染色学是为了rAAV9 EC减小而开发的.
- 优化涉及缓冲组合 (histidine,表面活性剂) 和化盐选 (酸).
- 优化的AEX方法被扩展为大规模制造.
主要成果:
- 采用AEX方法,ECs减少了三倍,达到与UC (20%) 相似的水平.
- 该过程在各种EC负载挑战中表现出了稳健性.
- 与UC相比,AEX简化了扩展,产量增加了14%,并保持了纯度和产品质量.
结论:
- AEX染色学为UC提供了一个可扩展和高效的替代方案,用于减少rAAV9的EC.
- 这种方法解决了基因疗法制造中的关键下游挑战.
- 优化的AEX工艺提高了rAAV9产品的有效性和可制造性.
