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Updated: Jun 25, 2025
08:57
Peptide and Protein Quantification Using Automated Immuno-MALDI iMALDI
Published on: August 18, 2017
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整合蛋白质L-不动化的环氧磁珠捕获与LC-MS/MS用于治疗性单克隆抗体量化血清中的量化
Rongrong Cao1, Songlin Xu1, Zhirui Yu2
1School of Chemical Engineering, Tianjin University, Tianjin 300072, China.
概括
一种新方法使用免疫磁性捕获和LC-MS/MS.精确量化生物流体中的单克隆抗体 (mAbs). 这种快速验证的测定方法简化了用于药理动力学和治疗药物监测研究的样本准备.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 分析化学 分析化学
- 药理学 药理学是指药理学的学科.
背景情况:
- 单克隆抗体 (mAbs) 在现代治疗中至关重要,推动了对精确生物分析方法的需求.
- 准确量化mAbs对于药理动力学 (PKs) /药理动力学 (PDs) 研究和治疗药物监测 (TDM) 是必不可少的.
- 现有的方法往往需要复杂的样本准备和延长分析时间.
研究的目的:
- 开发和验证一种新的,快速的免疫磁性捕获与液体染色体-并联质谱法 (LC-MS/MS) 方法相结合的方法.
- 在生物流体,特别是血清中量化基于免疫球蛋白G-卡帕的mAbs.
- 简化预处理程序,减少mAb量化总体分析时间.
主要方法:
- 合成磁性聚甘甲酸盐 (m-pGMA) 珠和固定蛋白质L,以创建一个免疫亲和吸收剂.
- 开发了一种工作流程,涉及免疫磁性捕获,珠子降解和快速三性消化,用于mAb净化和量化.
- 使用LC-MS/MS进行敏感和特异性检测,以rituximab作为内部标准 (IS).
主要成果:
- 开发的方法证明了最佳的mAb结合能力 (45.82 mg g-1) 和从小样本体积 (10 μL血清) 中有效的净化.
- 整个测定,包括样本准备和分析,在不到2.5小时内完成.
- 根据欧洲药物管理局 (EMA) 的指导方针进行的验证显示,达拉图马布和潘布罗利祖马布的线性 (2-400μg mL-1) 和精度 (CVs 0.7%-13.4%) 非常好.
结论:
- 新的免疫磁性捕获LC-MS/MS方法提供了一个强大的,快速的和验证的方法来量化生物矩阵中的mAbs.
- 该方法的效率和可靠性在小鼠的药理动力学研究中得到证实,突出了其临床应用的潜力.
- 这种技术为基于mAb的治疗方法的生物分析策略提供了显著的进步,支持药物开发和患者监测.
