在胆汁样本中通过UHPLC-MS确定阿曼素:LR-MS和HR-MS分析性能
Marta Leite1, Andreia Freitas2, Todd Mitchell3
1University of Coimbra, Faculty of Pharmacy, Health Science Campus, Azinhaga de Santa Comba, Coimbra 3000-548, Portugal; National Institute for Agricultural and Veterinary Research (INIAV), Rua dos Lágidos, Lugar da Madalena, Vila do Conde 4485-655, Portugal; REQUIMTE/LAQV, R. D. Manuel II, Apartado, Porto 55142, Portugal.
精确量化胆汁中的阿马尼对于治疗致命的中毒至关重要. 这项研究开发并验证了一种测量胆汁中阿马尼水平的方法,甚至在摄入后几天内确认其存在.
科学领域:
- 毒理学 毒理学 毒理学
- 分析化学 分析化学
- 公共卫生 公共卫生
背景情况:
- 错误识别的捕食物种的中毒导致致命的肝衰竭.
- 胆囊胆汁的去除可以扭转阿马托克辛中毒的晚期肝衰竭.
- 对于治疗的有效性,需要精确量化胆汁阿马尼丁.
研究的目的:
- 开发和验证一种方法来量化吸入胆囊胆汁中的α-和β-阿曼廷.
- 评估胆囊排水作为治疗阿马托克辛中毒的效率.
- 证实了肠肝循环在阿马托克辛诱导的肝毒性中的作用.
主要方法:
- 固相提取 (SPE) 随后是超高性能液体色谱学与质谱学 (UHPLC-MS) 结合.
- 使用UHPLC-MS/MS和UHPLC-ToF-MS的低分辨率质谱 (LRMS) 与高分辨率质谱 (HRMS) 的比较.
- 根据ICH指南和CIR 808/2021的验证,评估线性,特异性,稳定性,恢复性和精度.
主要成果:
- 经过验证的UHPLC-MS方法检测并量化了胆汁中的alpha-和beta-amanitin.
- 检测极限在0.32-3.46μg.kg-1之间,量化极限在5.62-9.03μg.kg-1.1之间.
- 在四名患者的胆汁样本中,在摄入后96小时内发现了显著的阿马尼丁水平.
结论:
- 经过验证的UHPLC-MS方法提供了胆汁中阿马尼的准确量化.
- 胆囊胆汁排水是有效的去除氨毒素,甚至在摄入后的几天.
- 肠肝循环在阿马托克辛肝毒性中起着重要作用,这突显了这种分析方法在临床管理中的重要性.
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