通过CRISPR/Cas12b辅助循环介导的同热放大,以轻松,快速和灵敏地量化慢性HBVDNA在单中
Haipo Xu1, Gengping Lin2, Ronghua Chen3
1The United Innovation of Mengchao Hepatobiliary Technology Key Laboratory of Fujian Province, Mengchao Hepatobiliary Hospital of Fujian Medical University, Fuzhou, 350025, PR China; Mengchao Med-X Center, Fuzhou University, Fuzhou, 350116, PR China; College of Chemical Engineering, Fuzhou University, Fuzhou, 350116, PR China.
Analytica chimica acta
|May 29, 2024
概括
一种新的CRISPR/Cas12b辅助测试提供了快速,灵敏的检测乙型肝炎病毒 (HBV) DNA. 这种临床检测非常适合在资源有限的环境中查慢性乙型肝炎 (CHB).
科学领域:
- 分子诊断学 分子诊断学
- 生物技术是生物技术.
- 传染病检测 传染病检测
背景情况:
- 慢性乙型肝炎 (CHB) 导致高死亡率,每年有数百万人未被诊断.
- 现有的基于PCR的试验不适合高负担,资源有限的环境.
- 克里斯普尔/卡斯系统提供了敏感和特定的临床检测 (POCT) 潜力.
研究的目的:
- 开发一种快速,灵敏和精确的B型肝炎病毒 (HBV) DNA量化方法.
- 为了创建一个适合资源有限的设置点的护理诊断测试.
- 为了解决迫切需要有效的HBV检测方法.
主要方法:
- 开发了一种单,单步CRISPR/Cas12b辅助循环介导同热放大 (LAMP) 试验.
- 优化反应缓冲区,酶度,记者,温度和添加剂.
- 使用236个临床样本进行验证,与实时定量PCR相比.
主要成果:
- 该试验在1小时内定量HBV DNA,检测极限为25副本/毫升.
- 在临床样本中显示了99.00%的灵敏度和100.00%的特异性.
- 没有与其他血液传播的病原体产生交叉反应.
结论:
- 开发的CRISPR/Cas12b-LAMP试验是一种方便可靠的临床诊断工具.
- 它显著提高了HBV诊断能力,特别是在资源有限的地区.
- 该试验有利于快速进行CHB查和评估治疗疗效.
