在大肠杆菌中使用pET表达载体对复合人间白素-2蛋白的可溶和不可溶表达

科学领域:

• 生物技术是生物技术.
• 蛋白质工程是指蛋白质工程.
• 免疫学 免疫学 免疫学

背景情况:

• 互白素-2 (IL-2) 是一种治疗癌症,艾滋病和自身免疫性疾病的重要蛋白质.
• 目前的生产方法效率低下,无法满足需求.
• 改善蛋白质产量和减少损失是IL-2生产所必需的.

研究的目的:

• 分析细胞质和周等离子体中介素-2 (IL-2) 表达,以提高蛋白质产量和生物活性.
• 为了优化大肠杆菌中IL-2的产生.

主要方法:

• 将IL-2克隆成pET-SUMO和pET-28a载体,用于溶解体和纳入体表达.
• 在各种大肠杆菌菌株中表达,在罗塞塔2 (DE3) 中产量最高.
• 大规模生产,净化,SDS-PAGE,西部涂抹和MTT生物测试用于活动确定.

主要成果:

• 在E. coli罗塞塔2 (DE3) 中使用夜间培养实现的最高IL-2表达.
• 周等离子体和细胞质IL-2净化分别产生了0.86 mg/mL和0.51 mg/mL.
• 周等离子体和细胞质IL-2在体外表现出显著的细胞毒性活性.

结论:

• 在大肠杆菌罗塞塔2 (DE3) 中IL-2的周周等离子体表达提供了更高的产量和显著的生物活性.
• 优化生产策略对于满足对IL-2治疗药物的需求至关重要.
• 周周等离子体IL-2可能实现本源蛋白质结构和功能,增强其治疗潜力.