使用连续稳定的生产细胞系进行强化晶状病毒载体生产的准透研究
Dale J Stibbs1, Pedro Silva Couto1, Yasuhiro Takeuchi2,3
1Department of Biochemical Engineering, University College London, Bernard Katz Building, Gower Street, London WC1E 6BT, UK.
Molecular therapy. Methods & clinical development
|June 3, 2024
概括
这项研究优化了使用准 perfusion 培养的 lentiviral 载体 (LV) 制造,实现了高可重复性和成功扩展到生物反应器,以增强基因疗法生产.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 细胞培养工程 细胞培养工程
- 基因治疗制造业 基因治疗制造业
背景情况:
- 病毒载体 (LVs) 对于基因疗法至关重要,但高效的制造仍然是一个挑战.
- 需要加强细胞培养过程,以满足对LVs日益增长的需求.
研究的目的:
- 优化准 perfusion 培养工艺,用于强化 lentiviral 载体制造.
- 在细胞培养瓶和生物反应器中确定LV生产的可扩展参数.
主要方法:
- 在8天的时间内利用准 perfusion 培养与稳定的生产者细胞系.
- 确定了最佳播种密度 (3 × 104 细胞 cm-2) 和 perfusion 速率 (1 VVD).
- 从小瓶子扩展到更大的多层瓶子和固定床生物反应器.
主要成果:
- 在测试的播种密度和 perfusion 速率中实现了类似的特定生产率.
- 在各个尺度的LV标题中证明了高可重现性 (CV<12%).
- 成功地将优化过程转移到iCELLis Nano生物反应器,产生1.62 × 108 TU.
结论:
- 优化的准 perfusion 培养使强化和可复制的 lentiviral 载体制造成为可能.
- 该过程可扩展到生物反应器,支持生产临床级LVs.
- 对于非常大规模的瓶生产,可能需要进一步优化,以解决气体交换限制.
