在精选的Bacillus thuringiensis宿主中对Vip3A的蛋白质工程使得蛋白质生产持续高
Sumarin Soonsanga1, Amporn Rungrod2, Boonhiang Promdonkoy2
1National Center for Genetic Engineering and Biotechnology, National Science and Technology Development Agency, 113 Thailand Science Park, Phahonyothin Road, Khlong Nueng, Khlong Luang, Pathum Thani, 12120, Thailand. sumarin.soo@biotec.or.th.
Current microbiology
|June 5, 2024
概括
研究人员对Bacillus thuringiensis (Bt) 进行了改造,以提高Vip3A杀虫蛋白的生产. 改性菌株产生高水平的恒温Vip3A,提高了作物保护潜力.
科学领域:
- 微生物学 微生物学
- 生物技术是生物技术.
- 昆虫毒理学 昆虫毒理学
背景情况:
- 修灵菌 (Bt) Vip3A是一种强大的杀虫蛋白,对作物保护至关重要.
- 现有的Bt菌株显示了Vip3A生产水平和蛋白质热稳定性之间的权衡.
- 优化适合宿主中的Vip3A生产对于有效的害虫管理至关重要.
研究的目的:
- 开发一种Bacillus thuringiensis (Bt) 菌株,以可靠,高水平地生产一种恒温稳定的Vip3A杀虫蛋白.
- 将Bt117的高生产能力与来自Bt294.4的Vip3A的热稳定性结合起来.
- 为了设计一种具有改进的杀虫性能和一致的蛋白质产量的重组Bt菌株.
主要方法:
- 通过将Bt117 Vip3A的C端区域替换为来自Bt294的Vip3Aa64的C端区域,从而产生Bt117-Vip3Aa64-C的蛋白质工程.
- 在父母和重组菌株之间对蛋白质表达,蛋白酶活性和蛋白质稳定性的比较分析.
- 评估杀性活动和Vip3A生产在多个培养批次中的产量.
主要成果:
- 重组Bt117-Vip3Aa64-C菌株保持了高,全长的Vip3A产量和低蛋白酶活性,类似于Bt117.
- 改造品种表现出增强的Vip3A热稳定性,在热储存后保留了幼虫杀虫活性.
- 实现了超过200mg/lVip3A的一致产量,显著优于父系Bt294菌株.
结论:
- 蛋白质工程成功地将高Vip3A产量与单一Bt菌株的增强热稳定性相结合.
- 开发的Bt117-Vip3Aa64-C菌株为生产热稳定Vip3A.提供了可靠和高效的系统.
- 这一进步为改善对昆虫害虫的生物控制策略带来了巨大的潜力.
