开发一种活细胞测定用于输送器ZnT8的方法

科学领域:

• 生物化学 生物化学
• 细胞生物学 细胞生物学
• 代谢疾病 代谢疾病

背景情况:

• 对于胰腺β细胞中的胰岛素调节至关重要.
• 溶解物载体输送器SLC30A8 (输送器8, ZnT8) 调节胰腺细胞中的积累.
• SLC30A8基因变异与糖尿病有关,突出显示了它在葡萄糖平衡中的作用.

研究的目的:

• 开发一种功能性试验来测量SLC30A8活性.
• 为了克服细胞模型内源性载体表达所带来的挑战.
• 为了在未来对影响SLC30A8功能的小分子进行选.

主要方法:

• 产生了一个HEK293细胞系稳定过度表达SLC30A8,促进血局部化.
• 使用FluoZin-3染料和活细胞成像来监测流量.
• 开发了一种针对SLC30A8活动的基于成像的新型检测方法.

主要成果:

• 成功创建了一个用于SLC30A8.8.的功能成像试验.
• 证明了在工程细胞中通过等离子膜测量流量的能力.
• 建立了针对SLC30A8的特定测定方法,与其他输送器不同.

结论:

• 一个新的,功能性成像测定SLC30A8已经开发.
• 这种试验为研究胰腺β细胞相关研究中的运输提供了一个特殊的工具.
• 该试验具有优化和应用在治疗标中等通量查中的潜力.